一、服务介(jie)绍(shao)
细(xi)胞迁(qian)移(yi)是(shi)指(zhi)细胞在接(jie)收到迁移信(xin)号或感(gan)受(shou)到某些(xie)物质(zhi)的(de)梯(ti)度(du)后而产(chan)生的移动。细胞(bao)迁移为细胞头(tou)部(bu)伪(wei)足的延(yan)伸(shen)、新(xin)的黏(nian)附(fu)建(jian)立(li)、细胞体(ti)尾(wei)部收(shou)缩(suo)在时(shi)空(kong)上的交(jiao)替(ti)过程。细胞迁移是正常(chang)细胞的基本(ben)功能之(zhi)一(yi)，是机(ji)体正(zheng)常生长发(fa)育(yu)的生理(li)过程，也是活(huo)细胞普遍(bian)存在的一种运动形(xing)式(shi)。胚(pei)胎(tai)发(fa)育、血(xue)管(guan)生成、伤(shang)口愈合(he)、免疫(yi)反(fan)应(ying)、炎(yan)症(zheng)反应(ying)、动(dong)脉(mai)粥(zhou)样(yang)硬化(hua)、癌(ai)症转移等(deng)过(guo)程中都(dou)涉(she)及细胞迁移。检测(ce)细胞迁移能力的实(shi)验包(bao)括(kuo)划(hua)痕实验(yan)和(he)Transwell实验。
二、实验原(yuan)理
细胞划痕实验是简(jian)捷(jie)测定细胞迁移运(yun)动与(yu)修复(fu)能(neng)力(li)的方法(fa)，在体外(wai)培(pei)养(yang)皿(min)或平(ping)板培养的单(dan)层(ceng)贴(tie)壁(bi)细胞上，用(yong)微(wei)量(liang)枪头或其(qi)它(ta)硬(ying)物(wu)在细胞生长的中(zhong)央区(qu)域划线，去(qu)除(chu)中央(yang)部分的细胞，然(ran)后(hou)继(ji)续培养细胞至(zhi)实验设(she)定的时间是一种(zhong)简单易(yi)行(xing)的检(jian)测细胞运动的方(fang)法，实验成本低，可以(yi)用来(lai)检测贴壁生长肿(zhong)瘤(liu)细胞的侵(qin)袭(xi)转(zhuan)移能力。Transwell的基本原理是将transwell小室放(fang)入培养板(ban)中，小(xiao)室内称(cheng)为上室，培养板内称为(wei)下室，上下(xia)层培养液以聚(ju)碳(tan)酸酯(zhi)膜相(xiang)隔，上室内添加上层培养液，下室内添(tian)加下层培养液(ye)。将(jiang)细胞种在上室内，由(you)于(yu)膜(mo)有(you)通(tong)透(tou)性(xing)，下层培养液中的成(cheng)分(fen)可以影响(xiang)到(dao)上室内(nei)的细胞，从(cong)而(er)可(ke)以研(yan)究(jiu)下层培养液中的成分对(dui)细胞生长(zhang)、运动等的影(ying)响。
三(san)、实验流(liu)程(cheng)
划痕(hen)实验
1. 用marker笔(bi)在6孔(kong)板背(bei)后均(jun)匀(yun)得划横线；
2. 在孔中加(jia)入细胞；
3. 第(di)二(er)天用枪(qiang)头垂至于背后的横(heng)线划痕；
4. 用PBS洗(xi)去处(chu)划下的细胞，培养不(bu)同(tong)时间，取(qu)样，拍(pai)照；
5. 数据(ju)处理：每个(ge)时间(jian)点(dian)细胞整(zheng)体迁移距(ju)离(li)=每(mei)个时间点距离长度-0时距离；
6. 结果(guo)统(tong)计(ji)分析。
Transwell实验
1. 采(cai)用未(wei)铺(pu) Matrigel 胶(jiao)的 Transwell 小室用于实验；
2. 制(zhi)备(bei)细胞悬(xuan)液；
3. 接种细胞；
4. 检测穿(chuan)过的细胞数(shu)；
5. 结果统计分析。
四(si)、客(ke)户提(ti)供(gong)
细胞株(zhu)(冻(dong)存(cun)株或(huo)培养好(hao)的细胞)，所(suo)需药(yao)品，药物处理方式和浓(nong)度。
五(wu)、公司(si)提供
基(ji)本实验步(bu)骤(zhou)、图(tu)片(pian)、数据分析(xi)结(jie)果、剩(sheng)余(yu)药品(pin)。
实验周(zhou)期(qi)：大约(yue)2-3周左(zuo)右(you)，具(ju)体需(xu)要(yao)根(gen)据细胞生长情(qing)况及(ji)实验内容(rong)而定(ding)。
